高效液相色譜法的優缺點
優點:
分離效率高,選擇性好,檢測靈敏度高,操作自動化,應用范圍廣;與氣相色譜法相比具有的優點:不受試樣的揮發性和熱穩定性限制,應用范圍廣;流動相種類多,可通過流動相的優化達到高的分離效率;一般在室溫下分析即可,不需高柱溫。
缺點:
分析成本高,液相色譜儀價格及日常維護費用貴,分析時間一般比氣相長。
色譜柱的柱效和保護柱
拿到一根新柱時,一定要先看其使用說明,然后測柱效,定期檢測柱效,保留在新色譜柱上得到的色譜圖,并記錄條件,定期檢測儀器的譜帶展寬,若應用于在線監測,應對色譜柱提供在線的物理保護和化學保護,例如采取安裝在線過濾器,自裝填料保護柱和預裝保護柱等。在線過濾器的作用是防止顆粒在柱頭累計,優點是基本不影響柱效,在需要高柱效的時候常用,常更換的消耗品是濾芯和墊圈。
保護柱的作用是防止柱子被化學污染,缺點是多數保護柱影響色譜柱的柱效,特別是在用微柱時,常用的是普通自裝填料的保護柱。最近新出的一些保護柱例如Sentry-guard保護柱,它的特點是高質量、高效填料、增加分析柱效、對臟樣品載荷能力大,能延長保護柱的壽命,手可擰緊接頭,安裝時不需要工具,省時省,可換芯式設計,能采用各種不同的填料,主要適用于非常臟非常復雜的樣品本底,例如,生化樣品,環境樣品和食品等,或者不想做太多的固相萃取,不想降低柱效果等情況。
色譜柱的清洗
對所做的樣品要有充分的了解,用對該樣品洗脫能力強的流動相清洗,對于硅膠柱,先用甲醇洗去極性雜質,然后用干燥的二氯甲烷和正庚烷100-200mL 依次活化,對于鍵和相柱,一般用甲醇-甲醇-水依次沖洗, 每種色譜柱有特定的清洗方法, 一定要看其使用說明。
色譜柱的存放
存放前除去雜質和鹽,采用合適的存放溶劑,避免色譜柱床的干枯,避免機械振動,防止細菌生長,注意存放的溫度。